稻癭蚊（RGM、Orseolia oryzae、Wood-Mason）是世界范圍內(nèi)一種重要的以莖為食的害蟲(chóng)，在過(guò)去幾十年中造成了嚴(yán)重的生產(chǎn)損失。水稻生產(chǎn)實(shí)踐表明，管理RGM的最可靠方法是種植含有宿主抗性的品種。然而，國(guó)際水稻研究所（IRRI）提出的水稻抗RGM的常規(guī)表型篩選方法已經(jīng)使用了大約30年，并且在一個(gè)托盤中只能評(píng)估12個(gè)水稻品種/品系（包括對(duì)照），它不適用于水稻種質(zhì)的高通量表型分析。因此，隨著現(xiàn)代分子技術(shù)的快速發(fā)展， 一種合適的方法來(lái)制備用于水稻對(duì) RGM 抗性的分子生物學(xué)研究的樣品是必不可少的。


稻癭蚊 (RGM) 自由取食試驗(yàn)的播種安排。 將一個(gè)托盤（長(zhǎng)、寬、高分別為58 × 38 × 9 cm）縱向分成1（A）、2（B）、3（C）和4（D）等塊，分別命名為方法1、2、3和4。將地塊劃分為12個(gè)小區(qū)，其中12行，包括1或2個(gè)對(duì)照，每行20株幼苗，按方法1排列。共設(shè)15個(gè)小區(qū)，每小區(qū)等距種植16、10、10株幼苗，分別按照方法 2、3 和 4

為確定四種播種合適的幼苗/RGM 密度，開(kāi)發(fā)并驗(yàn)證了一種高通量表型方法（HTPM），用于在一個(gè)托盤中感染 36 只雌性 RGM 成蟲(chóng)的 60 個(gè)品系/品種，如方法4–3（播種60個(gè)品系/品種）所述。此外，使用方法2 - 2（在一個(gè)托盤中播種30個(gè)品系/品種）同時(shí)檢測(cè)到一個(gè) RGM 抗性基因，其側(cè)翼是 12 號(hào)染色體上的標(biāo)記 12RM28346 和 12RM28739，并使用傳統(tǒng)和簡(jiǎn)化的分級(jí)系統(tǒng)進(jìn)行分析，使用與IRRI建議的相同方法證實(shí)了RGM抗性基因的遺傳分析。最后，24 株一桶的幼苗，用至少五只雌性RGM成蟲(chóng)處理是有效的，可以為昆蟲(chóng)發(fā)育觀察或分子生物學(xué)研究提供足夠的樣本。


育苗期水稻高通量表型方法（HTPM）對(duì)水稻膽蠓（RGM）的概述。A在侵染后一天用 RGM 處理的幼苗 (DAI)；B–D 幼苗在 7 DAI 時(shí)用 RGM 處理

開(kāi)發(fā)和改進(jìn)了一種高效可靠的水稻 RGM 抗性評(píng)估程序，并通過(guò)突變體篩選、基因定位、遺傳分析和昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育觀察進(jìn)行了驗(yàn)證。

來(lái)源：Plant Methods.Improved phenotyping procedure for evaluating resistance in rice against gall midge (Orseolia oryzae, Wood-Mason).Ling Cheng, Fugang Huang, Zhe Jiang, Baiyi Lu, Xiaohui Zhong & Yongfu Qiu
https://plantmethods.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13007-021-00823-5